您好，我最近也在做mrna的体外转录，我体外转录的是gfp的mrna，跑胶鉴定是一条带，大小位置也是对应的，转染293t细胞，同时转染了gfp的质粒作为阳性对照，48小时之后看荧光蛋白的表达，质粒出了荧光蛋白，但是mrna的没出，是因为mrna半衰期太短了，来不及表达 ...

各位大师，我最近在做体外合成RNA，之前是以线性化的质粒为模版合成cRNA,电泳显示一条带，最近用pcr产物最为模版合成，居然出现两条带，四个样品，三个都是两条带，这三个是同一个基因，另一个一条带，是

答：可以适当提高模板浓度，延长体外转录时间，以及在提取过程中适当加长沉淀时间，沉淀过夜。 问题 2：dsRNA 完整性检测过程中发现杂带？ 答：实验耗材均采用无 RNA 酶试剂、EP 管、移液器吸头，避免降解目的 dsRNA。 更多相关实验，欢迎移步丁香实验平台～

我用NEB T7 RNA聚合酶进行体外转录之后，再用试剂盒进行RNA纯化，请问体外转录体系中的DNA模板需不需要去除？去除的话用什么试剂？在RNA纯化前还是纯化后进行？。我用过Tkara的Dnase

第一次做cas9蛋白的体外转录，实验室的体外转录试剂盒是NEB的（加帽不加尾），需要模板自带poly尾才行，但是质粒上的cas9蛋白和poly尾序列之间有终止子。我用加T7启动子的引物PCR出cas9到poly这一段序列。这样子能做出来带有poly的cas9 mRNA吗？

体外转录原先是为了解决转录调控的分子机制提出来的。 现在，体外转录可以获得体内不存在的RNA，市场上有T7 SP6试剂盒。 体外转录出来的一般跟体内的不一样，体内转录本可以很长，体外转录本做不到体内那么长，而且，如果是双链DNA平端，到终止末端时 ...

请问做过体外转录的同学，depc水可以用于体外转录吗？体外转录的细节是什么？诺维赞的体外转录试剂盒的效果怎么样？

目的基因两端若设计有不同的粘末端酶切位点，PCDNA3.1是很容易连接的。顺便提醒你PCDNA3.1是（＋）还是（－），别弄反 我们用promega的T7***体外转录翻译系统是很好翻译的，Promega的手册很详细，供参考

们想用生物素标记RNA，然后去做RNA pull-down实验，采用PCR扩增目的基因全长cDNA，胶回收后进行体外转录，体外转录试剂盒是promega，不同的是我们把rNTP (25Mm) MIX 换成生物素标记Biotin RNA Labeling Mix, 其中ATP、CTP、GTP各10mM，6.5mM UTP，3.5mM生物素-16-UTP，进行如下反应

我最近一次在做体外转录rna，大小100bp多点，dna模板电泳条带单一，在-20℃保存了12天进行体外转录，体外转录步骤按照试剂盒进行（之前也常做），转录出来的rna浓度和a260/280 a260